罗涛 向雪静 王中华
【摘要】意图 讨论阴道涂片对断定SD大鼠妊娠的使用价值，为基础医学研讨供应一种愈加简洁、精确地断定大鼠妊娠时刻的办法。办法 将40只雌性大鼠和20只雄性大鼠，依照2：1的份额进行合笼，次日晨对40只合笼雌鼠进行阴道涂片，显微镜下调查记载，并剖析。成果 镜下发现许多精子可断定该雌鼠已受孕，若在镜下未发现精子可将该鼠持续合笼养殖，次日再查。定论 对断定大鼠妊娠的时刻，阴道涂片是一种精确率很高的办法，此法在进步试验动物妊娠模型树立的精确性方面具有实际含义。
【关键词】阴道涂片；SD大鼠；妊娠
【中图分类号】R332 【文献标识码】B 【文章编号】ISSN.2095-6681.2018.11..02
SD大鼠是国内最常用医学试验动物之一，大鼠8周即性成熟，妊娠期为19～21天，为全年多动情性动物。现如今，许多医学动物试验，都需求用到大鼠孕鼠模型。所以，怎么精确判别雌鼠受孕，并知晓其怀孕天数，对试验成果的精确性起着关键性的效果。
1 试验资料
试验动物：未交配SD大鼠共60只，雌性40只，体重（230±10）g，雄性20只，体重（300±10）g。由昆明医科大学医学试验动物中心供应，清洁级。
养殖条件：室内，室温，天然光照，一般清洁级鼠饲料自在采食养殖，自在饮用自来水。
所需仪器：一般光学显微镜，消毒棉签，洁净玻片，生理盐水。
2 办法
2.1 养殖合笼
60只SD大鼠习惯性养殖一周，男女分笼养殖，期间留意调查大鼠的活动规则和饮食状况。依照男女2∶1的份额进行合笼，一般合笼时刻为黄昏8点，正常供应饲料和水。于次日早晨8点进行雌鼠的阴道涂片查看。
2.2 阴道涂片
取待查看的雌鼠置于另一空笼子铁丝盖上，拇指、食指和中指捏住其尾巴，悄悄向后翻起尾巴，显露阴道口，用沾有生理盐水的小棉支在阴道口处稍逗留，以让雌鼠习惯，悄悄刺进大鼠阴道而且缓慢滚动，渐渐将小棉支抽出，将小棉支上的黏液均匀涂在载玻片上，肉眼调查并镜检（10×10倍）。
2.3 记载并计算
对每只雌鼠的涂片进行记载，并选用SPSS 17.0计算软件计算，选用x2查验，以P<0.05为差异有计算学含义。
验中fisher精确概率法查验。
3 结 果
假如大鼠交配成功，阴道涂片下能够调查到精子。一般光学显微镜100倍下调查，若发现镜下有呈长条形，头端稍膨大、呈钩状物质（如图1），则可断定雌鼠已交配受孕。
调查第一次的合笼交配，阴道涂片成果显现17只雌鼠镜下调查到有精子，占比42.5%，7只处于动情前期，6只处于动情期，4只处于动情后期，有6只大鼠阴道掉落细胞无特别改变。把镜下未调查到有精子的雌鼠再进行第2次合笼后，陰道涂片发现，镜下调查到5只要精子，占比21.7%。再进行第三次合笼后，涂片显现镜下有1只查出精子，占比5.5%。本试验中发现，但凡阴道涂片发现精子的均为妊娠大鼠。经过计算，有差异性（P<0.05）。阐明该办法断定妊娠的精确性很高，简直为100%。
4 讨 论
医学动物试验是科学研讨中必不可少了，各种大鼠模型的制造关于咱们的基础医学研讨至关重要。快速精确的制备孕鼠模型及明晰知晓大鼠孕龄是确保试验顺利进行的前提条件。现在检测大鼠受孕办法主要有两种：阴栓查看法和阴道涂片法[1，2]。阴栓查看法就是在大鼠交配后查看雌鼠阴道是否有分泌物。可是，查找阴栓进程比较困难，假如调查时刻过早，阴栓或许还未构成。假如调查时刻过晚，或许存在液化和掉落的状况[3]，一旦阴栓掉落，掉入鼠笼垫猜中，很难被找到。所以就形成成果的不精确性。而阴道涂片的操作进程快速、精确。不只为医学试验动物模型的制造节省了时刻，也确保了试验模型的精确性。
经过试验成果，咱们发现，大鼠初度合笼交配后，受孕率为42.5%。重复第2次合笼后查看受孕率为21.7%，第三次合笼后查看的受孕率只要5.5%。这个成果显现，雌鼠再查看出没有受孕后，是能够重复合笼测验的，可是跟着合笼的次数越多，受孕率越低。咱们剖析，屡次重复的对同一只雌鼠进行阴道涂片，阴道影响过多，或因操作进程中旋转太猛，都或许会伤到阴道壁，形成受孕率越来越低，乃至呈现不孕的成果。
综上所述，选用阴道涂片法断定大鼠妊娠，具有快速、精确、简洁、有用等长处。确保了试验模型的精确性，不只减少了模型制造时刻，也降低了因试验模型的不精确而发生的本钱。所以，阴道涂片对断定SD大鼠妊娠的使用具有重要的价值。
参考文献
[1] 李凤奎.试验动物与动物试验办法学[M].郑州大学出版社.2007.392-393.
[2] 何秋明，肖尚杰，夏惠敏.大鼠阴道图片的调查[J].广州医学院学报，2007，35（4）：54-56.
[3] 张 森，王 新，韦旭斌，等.大鼠发情周期各阶段的阴道细胞改变调查[J].动物医学发展，2006，27（2）：69-72.
本文修改：吴宏艳
